Fluorescenční holografický mikroskop

Světelný mikroskop je navržený pro zobrazování průsvitných předmětů schopných emitovat luminiscenční (fluorescenční) záření. Umožňuje současně studovat funkci i strukturu živých mikroobjetků, jako např. rostlinných a živočišných buněk a mikroorganizmů. Lze jej využít také při zobrazování technických mikroobjektů.

Popis technologie

Fluorescenční holografický mikroskop poskytuje současně dva módy zobrazení rekonstruované z hologramu zachyceného digitální kamerou.

První obrazový mód zobrazuje optický řez intenzity fluorescenčního záření. Optický řez v celém zorném poli je získán z jediného hologramu zaznamenaného jednorázově. Není tedy potřeba rastrovat v zorném poli, jako u konfokálního mikroskopu a je tak možné dosáhnout vysoké rychlosti snímání. Ve srovnání se standartními konfokálními mikroskopy lze dosáhnout tenčích optických řezů a tloušťka těchto řezů je konstantní v celém zorném poli (na rozdíl od současné light-sheet mikroskopie).

Druhý obrazový mód zobrazuje, relativně k předmětové rovině, fázové rozdíly mezi opačnými stranami vzorku a lze jej využít pro rekonstrukci prostorového rozložení indexu lomu ve vzorku. Toho nelze dosáhnout u klasických holografických mikroskopů, jelikož ty umožňují získat pro každý pixel pouze integrální hodnotu indexu lomu podél optické osy. Prostorové rozložení indexu lomu je kvantitativní informace, která je u vzorků, jakými jsou např. živé buňky, úměrná hustotě suché hmoty ve vzorku obsažené.

Hlavní výhody

• Dva módy zobrazení – prostorové rozložení fluoroforů, kvantitativní rekonstrukce prostorového rozložení indexu lomu
• Není potřeba rastrovat, optický řez v celém zorném poli je zachycen jednorázově, což umožňuje vysokorychlostní snímání obrazu
• Zobrazování živých mikroobjektů